T/ZJZYC 003-2021 铁皮石斛种苗生产技术规程
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内容简介
本文件规定了铁皮石斛种苗的术语和定义、种苗生产、质量要求、包装、标志、运输与贮存、田间管理等要求
本文件适用于铁皮石斛种苗生产4 种苗生产留种原植物应符合《中国高等植物图谱》收载的兰科植物铁皮石斛(又名黑节草DendrobiumofficinaleKimuraetMigo)的植物特征，经过鉴定确认或品种审定。选用适合当地栽培环境的优质、高产、抗病、抗逆性好的种源。留种地应具有良好的物理隔离措施或方圆1000m内无其它种类石斛。留种株应该选择品种特性纯正、生长健壮的植株。4.2实生苗培育4.2.1制种盛花期，取同一株系内生活力最强的花药和柱头，进行授粉。母本在授粉后立即摘除唇瓣，及时挂牌标志。授粉后，蒴果开始转黄时，采收饱满、成熟的果实。4.2.2蒴果播种将采收的蒴果经无菌水清洗后置于超净工作台，75%乙醇浸泡1min后，无菌水冲洗表面3次～5次。然后用浓度为1.0%～1.5%的NaClO浸泡20min，并不停摇晃，用无菌水冲洗5次～6次，使无异味，无菌滤纸吸干水后，用无菌剪刀在蒴果顶部剪一缺口，轻轻抖动，将蒴果内的种子均匀撒在种子萌发培养基上MS+椰子汁100ml/L～200ml/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8。4.2.3继代培养待幼苗长到1mm～3mm时，转接到继代培养基MS+6-BA0.5mg/L～1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8，进行继代培养。4.2.4生根培养待幼苗长至1.0cm～1.5cm高时，转接到生根培养基1/2MS+香蕉100g/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8，进行生根培养。4.3无性系培育4.3.1外植体消毒切取带芽的长1.0cm～2.0cm的茎段，无菌水清洗后置于超净工作台，用75%乙醇浸泡1min，无菌水冲洗表面3次～5次，然后用浓度为1.0%～1.5%的NaClO浸泡，加1～2滴Tween-20，并不断摇动，8min～10min后用无菌水冲洗5次～8次，用无菌滤纸吸干水分。4.3.2不定芽诱导和增殖切取带芽的长0.5cm～1.0cm的茎段，接种到不定芽诱导培养基MS+椰汁150ml/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6。待长出不定芽后，接种到不定芽增殖培养基MS+6-BA1.0mg/L～1.5mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8。不定芽继代控制在6代～8代。4.3.3原球茎诱导、增殖和分化剥取5mm左右带分生组织的茎尖，接种到原球茎诱导培养基上MS+6-BA1.5mg/L～2.5mg/L+NAA0.2mg/L+土豆100g/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8。将原球茎接种到原球茎增殖培养基上MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.5mg/L+土豆50g/L+蔗糖30g/L，pH5.6～5.8。将原球茎接种到原球茎分化培养基上MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8。原球茎继代控制在6代～8代。4.3.4生根培养待幼苗长至1.0cm～1.5cm高时，转接到生根培养基1/2MS+香蕉100g/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L，pH5.6～5.8，进行生根培养。4.4培养条件光照强度30μmol·m-2·s-1～60μmol·m-2·s-1，白天温度25℃±2℃，晚上温度22℃±2℃（黑暗培养）。每天照光12h～14h。5质量要求组培瓶苗的质量等级指标、检验方法、检验规则参见附录A。6包装、标志、运输与贮存6.1包装标志组培瓶苗宜用塑料箱或纸板箱包装。包装箱内附种苗出厂（圃）合格证，外面应注明实生苗或原球茎诱导苗、数量、出苗日期、批号、标准号、生产单位的地址和联系电话，和其他按GB/T191的规定执行。6.2运输运输过程中应控温，温度以22℃～25℃为宜。6.3贮存组培瓶苗常温弱光照条件下可以贮存7d～10d。7田间管理田间管理按照DB33/T635-2015执行。
起草单位
浙江大学、浙江省中药材产业协会、浙江省农业技术推广中心
起草人
毛碧增、张亚惠、钱亦纯、何伯伟、王松琳、叶梓
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